Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu cd

W tym modelu, samce Med12fl / y Amhr2-cre hodowano z samicami Med12Rmt / + w celu wytworzenia samic Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre. Podzbiór komórek macicy będzie wyrażał Med12 c.131G> A na chromosomie X Med12-null tła (Figura 1B). Przeanalizowaliśmy linie rozrodcze Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre w wieku 8 tygodni i powyżej 12 tygodni. Jednobiegowe samice myszy Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre wykazywały zmiany patologiczne związane z tworzeniem mięśniaków mięśniaków już w 8 tygodniu życia (dodatkowa Figura 3, B i D). Ocena histologiczna wykazała, że w wieku powyżej 12 tygodni 80% macicy zawierało zmiany odpowiadające mięśniom gładkokomórkowym. Zmiany te składały się ze złogów macierzy pozakomórkowej (ECM), którym towarzyszy infiltracja fibroblastów i makrofagów, hiperplazja i dezorganizacja rozmieszczenia włókien mięśniowych, co doprowadziło do całkowitego zniszczenia architektury myometrium. Nowotwory powstały w Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre. Zmutowane macice eksprymowane z mutantem Med12, jak pokazano przez ekspresję FLAG, która została połączona z mutantem Med12 w naszym konstrukcie ROSA (Supplemental Figure 2F). Ryc. 1Med12fl / + Myszy Med12Rmt / + Amhr2-Cre rozwijają maciczne mięśniaki macicy. (A) Model myszy (Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre). Podzbiór komórek eksprymuje odmiana Med12 c.131G> A z autosomalnego locus ROSA, podczas gdy chromosom X pochodzący z chromosomu A Med12 będzie albo warunkowo wycięty w locus, albo wyciszony przez inaktywację chromosomu X w drugim locus. Transkrypcja ze zmutowanego autosomu (Amt / +) jest wskazana strzałką, a region promotora przedstawiony jest na zielono. Niebieska gwiazda wskazuje wariant Med12 c.131G> A. Różowa gwiazdka wskazuje zmieniony allel Med12 na chromosomie X (Xcko), który w obecności Amhr2-Cre utraci eksony 1. 7. W komórkach, w których allel zainspirowany Med12 jest dezaktywowany, WT Med12 będzie wyrażany. W komórkach z aktywnym allelem zmutowanym Med12 będzie eksprymowany tylko mutant Med12. Czerwony chromosom wskazuje unieczynniony chromosom X. (B) sekwencjonowanie cDNA z tkanki nowotworowej wykazujące obecność zmutowanego wariantu c.131G> A (zielony pik chromatogramu, czarna strzałka) pod nieobecność allelu WT Med12, zgodnego z monoklonalnym składem komórek nowotworowych. (C) Osiemnastotygodniowa wieloródkowa macica Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre ujawniła 4-mm guza nowotworową (zaznaczoną białymi kropkowanymi liniami). (D) Badanie histologiczne potwierdziło obecność dużego guzka mięśniaka gładkokomórkowego wyrastającego z warstwy mięśni gładkich macicy. Obraz o wyższym powiększeniu czarnopomarańczowego obszaru nowotworowego pojawia się w E i pokazuje obecność pęczków z pulchnymi komórkami wrzecionowatymi, eozynofilową cytoplazmą i depozytami ECM. (F) Dwudziestoczteroletnia wieloosobowa macica Med12fl / + Med12Rmt / + Amhr2-Cre z wieloma guzkami (białe strzałki)
[przypisy: odkleszczowe zapalenie opon mózgowych, olej z konopii indyjskiej opinie, rezonans magnetyczny pleszew ]
[hasła pokrewne: poradnia preluksacyjna łódź, rezonans magnetyczny pleszew, odkleszczowe zapalenie opon mózgowych ]