Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych czesc 4

Dwa dni po wysianiu szacowano, że około 15% wszystkich komórek Cck-GFP obserwowano w kontakcie z neuronem lub włóknem neuronalnym. Warto zauważyć, że żywotność pojedynczych komórek enteroendokrynnych Cck-GFP w hodowli jest niewielka. Jeden dzień po wysianiu, tylko 5 komórek Cck-GFP na każde 1000 pozostawało przy życiu (0,50%. 0,17% przy d1 do 0,10%. 0,02% przy d6, średnio 3 dołki na replikę, n = 6). Niemniej fakt, że łączność jest podsumowywana in vitro ma ogromne znaczenie, ponieważ demonstruje specyficzne powinowactwo między komórkami enteroendokrynnymi i zewnętrznymi neuronami czuciowymi przy braku jakiegokolwiek innego wkładu komórkowego. Notatka na temat komórek enteroendokrynnych. długość życia. Zaproponowano, że ponieważ komórki nabłonkowe, w tym komórki enteroendokrynne, przewracają się co 5 dni, okno komórek enteroendokrynnych do łączenia się z neuronami jest ograniczone (7). Jednak niektóre doniesienia sugerują, że komórki enteroendokrynne mogą żyć dłużej niż enterocyty nabłonka (16). Zastanawialiśmy się, czy komórki enteroendokrynne Pyy-GFP mogą żyć dłużej niż 5 dni i zastosowały znakowanie pulsem BrdU u myszy Pyy-GFP w celu określenia ich okresu życia w porównaniu z innymi komórkami nabłonkowymi jelit. Chociaż początkowa liczba wyznakowanych komórek Pyy-GFP była niska (6,3%. 1,2%, n = 3), istniały dowody na wyznakowane komórki enteroendokrynne Pyy-GFP 60 dni po znakowaniu, co wskazuje, że długowieczne komórki nabłonkowe stanowią część populacja komórek enteroendokrynnych. Przykłady przedstawiono na Uzupełniającej Figurze 2. Dane te sugerują, że co najmniej populacja komórek enteroendokrynnych może mieć porównywalną długość życia do innych unerwionych biosensorów, takich jak neurony receptora węchowego lub komórki smakowe (17, 18). Cechy synaptyczne w komórkach enteroendokrynnych. Badania mikroskopowe wykazały, że poza pęcherzykami o dużych gęstościach zawierającymi hormony, komórki enteroendokrynne mają również małe przezroczyste pęcherzyki synaptyczne (19), co sugeruje, że komórki enteroendokrynne mają niezbędne organelle do neurotransmisji. Tak więc uznaliśmy, że połączenie neuronowe komórki enteroendokrynnej może mieć cechy synaps. Oczyściliśmy komórki enteroendokrynne Pyy-GFP przez FACS i przeanalizowaliśmy ekspresję genów kodujących zdefiniowane białka występujące w pre- i postsynapsach za pomocą ilościowej PCR z odwrotną transkryptazą (qRT-PCR) (20). Rzeczywiście, w porównaniu z komórkami nabłonka jelitowego nie-GFP, jelitowe i okrężnicy komórki enteroendokrynne eksprymowały pewną liczbę genów kodujących białka presynaptyczne, w tym: synapsin 1, piccolo, fagot, MUNC13B, RIMS2, latrofilinę i transksynaptyczną neureksynę 2 (21). Komórki enteroendokrynne Pyy-GFP również wyrażały dekarboksylazę DOPA i hydroksylazę tyrozynową. oba niezbędne enzymy w syntezie dopaminy w neuroprzekaźnikach (rysunek 2A i tabela dodatkowa 1). Figura 2 Komórki enteroendokrynne wyrażają białka pre- i postsynaptyczne. (A) Analiza ekspresji genu w komórkach enteroendokrynowych Pyy-GFP posortowanych FAC wykazuje ich ekspresję białek presynaptycznych i postsynaptycznych
[hasła pokrewne: rezonans magnetyczny pleszew, rezonans magnetyczny kraków cennik, czynniki ryzyka chorób układu krążenia ]
[patrz też: olej z konopii indyjskiej opinie, narodowy fundusz zdrowia skierowania, jak ugotowac kasze jeczmienna ]