Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej cd

Dane analizowano za pomocą ANOVA, a następnie testu Dunnetta. Do analizy danych CPP zastosowano dwuczynnikową ANOVA (parowanie vs. leczenie) i test post hoc Bonferroni. Wyniki różnic analizowano za pomocą podwójnego testu t dla pary. *** P <0,001 vs. h. A / h. A. n = 8 / grupa. (E) Immunohistochemia wykazała translokację błony komórkowej PKC. (oznaczone strzałkami) w blaszce powierzchniowej grzbietowego rdzenia kręgowego w TOW, ale nie hAA / h AA, myszy. PKC. Przedstawiono intensywność fluorescencji w reprezentatywnych komórkach (oznaczonych przerywanymi strzałkami). Czerwony, PKC .; zielony, NeuN. Pręty skali: 20 m. n = 15 kawałków od 3 myszy. Następnie określiliśmy odpowiedzi nocyceptywne myszy TOW w kierunku wywołanych bodźców mechanicznych i termicznych. W porównaniu z myszami kontrolnymi (1,20 . 0,20 g), myszy TOW wykazały znacznie obniżony próg bólu (0,09. 0,03 g) do normalnie nieszkodliwego sondowania filamentów von Freya (P <0,001, Figura 1C), co wskazuje na obecność allodynii dotykowej. Dodatkowo, myszy TOW wykazywały skróconą latencję odpowiedzi na szkodliwe bodźce cieplne zastosowane do tylnej łapy (3,52. 0,38 s w myszach TOW vs. 10,91. 0,36 s u myszy kontrolnych, P <0,001, Figura 1D), wskazując na obecność przeczulicy termicznej. . Aby zbadać podstawowe mechanizmy przewlekłego bólu w SCD, zbadaliśmy sygnalizację nocyceptywną, w której pośredniczy PKC. Zidentyfikowaliśmy PKC. jako podwójny mediator zarówno bólu spontanicznego, jak i wywołanego bólem w neuropatii obwodowej wytwarzanej przez paklitaksel (13). Dlatego ważne jest zbadanie, czy zależne od PKC. Mechanizmy są istotne dla przewlekłego bólu w SCD. Najpierw oceniliśmy rdzeniowy PKC. aktywność myszy TOW, analizując PKC. translokacja błony komórkowej. Immunoreaktywność PKC. znajdował się głównie w powierzchniowych blaszkach rogu grzbietowego rdzenia kręgowego (ryc. 1E). U myszy kontrolnych, PKC. rozmieszczone równomiernie na błonie komórkowej i cytosolu (rysunek 1E). Przeciwnie, znaczące wzbogacenie błony PKCa, wskazujące na jego aktywację, obserwowano w powierzchniowych blaszkach rogu grzbietowego rdzenia kręgowego u myszy TOW (Figura 1E). Wszystkie komórki z PKC. translokacja jest pozytywna dla immunoreaktywności NeuN (dodatkowa Figura 2). Z drugiej strony, 83%. 7% komórek NeuN-dodatnich miało znaczący PKC. translokacja (łącznie 450 komórek zostało zobrazowanych z 3 myszy, 5 slajdów / mysz). Analiza Western blotting wykazała również znaczącą translokację błony PKC. z cytozolu i zwiększone poziomy ufosforylowanego PKC. (p-PKCa) u myszy TOW (Suplementowa Figura 3), które są zgodne z hiperaktywacją rdzeniowego PKC. u myszy TOW, korelując z trwałym stanem bólu. Ponadto PKC. translokacja wystąpiła w neuronach hamujących GABAergiczne (VGAT +), ale nie w glutamatergicznych pobudzających (VGLUT2 +) (Suplementowa Figura 4) [przypisy: acai berry 900 cena apteka, wstrzykiwacz do insuliny, schuring ] [hasła pokrewne: minocyklina, dna moczanowa leczenie ziołami, pirogronian ]