Izolacja białek związanych z polipeptydami Rh z nie-ludzkich erytrocytów.

Uważa się, że antygeny Rh mogą być ważne dla utrzymania prawidłowej integralności błony erytrocytów. Pomimo swojej nazwy antygeny Rh są serologicznie obecne tylko na ludzkich erytrocytach. Wiadomo, że strukturalne polimorfizmy Rh mieszczą się w rodzinie nieglikozylowanych 322,000 integralnych białek błonowych, które można oczyszczać metodą chromatografii na hydroksyapatycie. Mr 32.000 integralnych białek błonowych oczyszczono podobnie z pęcherzyków erytrocytów wytworzonych z małp rezus, krów, kotów i szczurów, ale nie można było oczyścić z ludzkich erytrocytów Rhod, rzadkiego zespołu pozbawionego antygenów Rh. Oczyszczone 32 000 polipeptydów Mr wyznakowano 125I, trawiono chymotrypsyną i stwierdzono, że jest 30-60% identyczne z ludzkimi polipeptydami Rh w porównaniu z dwuwymiarowym mapowaniem jodopeptydów. Read more „Izolacja białek związanych z polipeptydami Rh z nie-ludzkich erytrocytów.”

Wiązanie fibrynogenu z ludzkimi monocytami.

Badano interakcje fibrynogenu z monocytami. Po stymulacji ADP (10 mikroM) lub trombiną (1 U / ml), wolne od płytek zawiesiny ludzkich monocytów wiążą fibrynogen 125I z dwoma różnymi powinowactwami w specyficznej reakcji zależnej od Ca2 + z nasyceniem przy 5,80-7,35 X 10 (. 7) M dodanego białka. Wiązanie fibrynogenu ze specyficznymi receptorami na monocytach indukuje aktywność prokoagulacyjną tych komórek. Komórki trombasthenowe lub prawidłowe monocyty wstępnie inkubowane z przeciwciałem monoklonalnym wobec kompleksu glikoproteiny płytkowej IIb / IIIa (10E5) nie wiążą fibrynogenu i nie wykazują aktywności prokoagulacyjnej. Read more „Wiązanie fibrynogenu z ludzkimi monocytami.”

Demonstracja i charakterystyka specyficznych miejsc wiązania czynnika VIII / czynnika von Willebranda na ludzkich płytkach krwi.

Obecność specyficznych miejsc wiążących czynnik VIII / czynnik von Willebranda (FVIII / vWF) na ludzkich płytkach krwi wykazano za pomocą 125I-FVIII / vWF i przemywano ludzkie płytki krwi. Wiązanie jest zależne od rystocetyny i zwiększa się proporcjonalnie do stężenia rystocetyny od 0,2 do mg / ml. Wiązanie 125I-FVIII / vWF z płytkami może być konkurencyjnie hamowane przez nieznakowany ludzki lub bydlęcy FVIII / vWF, ale nie przez ludzką trombinę, fibrynogen, alfa-2-makroglobulinę, kolagen koński lub lektynę z Ricinus communis. Scatchardowa analiza danych wiązania wskazuje, że stała dysocjacji receptorów FVIII / vWF wynosi 0,45-0,5 nM. Istnieje 31 000 miejsc wiązania na płytkę krwi przy mg / ml stężenia rystocetyny. Read more „Demonstracja i charakterystyka specyficznych miejsc wiązania czynnika VIII / czynnika von Willebranda na ludzkich płytkach krwi.”

Wpływ kolcemidu na hematopoezę u myszy.

Stwierdzono, że preparat Colcemid wywołuje zależną od dawki i planową magakaryocytozę szpiku kostnego i trombocytozę obwodową. Odpowiedź można podzielić na wczesne i późne komponenty. Wydaje się, że wczesny składnik był wynikiem bezpośredniego efektu stymulującego, prawdopodobnie poprzez wzmocnienie endoreduplikacji w zatrzymanych metafazach prekursorach megakariocytów. Ewaluacyjna odpowiedź stymulacyjna została zredukowana na schematach toksycznych leków. W przeciwieństwie do tego, późny składnik odpowiedzi trombopoetycznej został najlepiej przedstawiony w najbardziej toksycznych schematach leków. Read more „Wpływ kolcemidu na hematopoezę u myszy.”

Wpływ bliższej wotropii żołądka na obliczone wydzielanie objętościowe HCO3 żołądka i nierównomierne wydzielanie objętościowe u człowieka. Badania w warunkach podstawowych i infuzji gastryny-17.

Obliczyliśmy wydzielanie HCO3- i H + w żołądku, a także wydzielanie objętościowe nie ciemieniowe i ciemieniowe, u 15 pacjentów z dwunastnicą, którzy wcześniej przeszli skuteczną bierną wotomię żołądka, 15 nieoperowanych pacjentów z chorobą wrzodową dwunastnicy i 15 normalnych osób kontrolnych. Wyjściowe wydzielanie HCO3- nie uległo istotnej zmianie po wotomii, podczas gdy podstawowe wydzielanie H +, objętość ciemieniowa i nierównomierne wydzielanie objętościowe uległy znacznemu zmniejszeniu. Dożylny wlew gastryny-17 zmniejszał wydzielanie HCO3 w żołądku o około 50% zarówno u nieoperowanych pacjentów z wrzodem, jak i u zdrowych osób (P mniej niż 0,05). Wlew Gastrin-17 nie hamował wydzielania HCO3 w żołądku po wotomii. W rzeczywistości średnie wydzielanie HCO3 w żołądku wzrosło w niemal znacznym zakresie w odpowiedzi na gastrynę (P = 0,06). Read more „Wpływ bliższej wotropii żołądka na obliczone wydzielanie objętościowe HCO3 żołądka i nierównomierne wydzielanie objętościowe u człowieka. Badania w warunkach podstawowych i infuzji gastryny-17.”

Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy cd

Aby zbadać potencjalną rolę receptora LDL (LDLR) w pośredniczeniu w działaniu nadekspresji Trib1, zwróciliśmy się do myszy z niedoborem Ldlr (Ldlr Read more „Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy cd”

Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad 7

Przeciwnie, ekspresja Amhr2-Cre-p skierowana na zmutowaną formę. -Kateniny powodującej wzrost funkcji powoduje nowotwory zarówno w myometrium myszy, jak i podścielisku (18). Wyniki te wskazują, że mutacje eksonów Med12 mają specyficzne działanie rakotwórcze w komórkach mięśni gładkich. aCGH of Med12 c.131G> Mysz macicy nie tylko ujawniła aberracje całego genomu, ale także wykazała złożone zmiany chromosomowe, takie jak chromothripsis. Niedawno w ludzkich mięśniakach gładkich odnotowano chromotripsis i zaproponowano go jako możliwy mechanizm progresji guza (19). Read more „Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad 7”

Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad 5

W związku z tym zbadaliśmy, czy leczenie myszy LFS metforminą na poziomach terapeutycznych u ludzi wywołałoby sygnalizację antyproliferacyjną (22). Wstrzyknięcie ip metforminy w dawce 250 mg / kg masy ciała odzwierciedlało kaskadę sygnalizacyjną autofagii / GSK3 / cykliny Dl, jak zaobserwowano w hodowanych komórkach (Figura 2C). Warto zauważyć, że poziomy pY-GSK i cykliny D1 ponownie były bardziej wrażliwe na metforminę niż pT-AMPK (Figura 2C). Było to zgodne ze sprawozdaniem, że indukcja pT-AMPK przez metforminę nie może być wykryta w tkankach w przeciwieństwie do komórek hodowanych (23). W oparciu o te wyniki, testowaliśmy wykonalność badania przeżycia bez raka u myszy p53172H / H leczonych metforminą w wodzie do picia. Read more „Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad 5”

Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów ad 5

Komórki HEK293T transfekowano MCM8-GFP dzikiego typu (WT) lub zmutowanym MCM8-GFP (p.P149R, pokazano na zielono) i traktowano 300 nM MMC przez 6 godzin. Nuklei wybarwiono kontrastowo DAPI (niebieski). Ogniska powstają w komórkach 293T eksprymujących MCM8 typu dzikiego, ale nie w komórkach wyrażających zmutowany MCM8. Wykonano cztery niezależne doświadczenia dla transfekcji MCM8-GFP (WT vs. p.P149R) sprzężone z uszkodzeniem DNA. Read more „Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów ad 5”

Ciągły wzrost funkcji receptora a5GABAA po uszkodzeniu pamięci pogarsza pamięć ad 5

Ekspresja podjednostek a5 na powierzchni komórki została rzeczywiście zwiększona do 128% kontroli po 24 godzinach i do 130% kontroli po tygodniu; jednak poziomy powróciły do poziomu podstawowego o 2 tygodnie (rysunek 2J). Całkowita ekspresja podjednostek a5 pozostawała niezmieniona we wszystkich punktach czasowych (figura 2K). Ekspresja podjednostek a3 na powierzchni komórki, która współdziała z podjednostkami A5 w celu utworzenia GABAAR (19), była również zwiększona po 24 godzinach, ale nie po lub 2 tygodniach po etomidacie (Suplementowa Figura 2A). W przeciwieństwie do wyrażenia. podjednostki i podjednostki a 1, które przyczyniają się odpowiednio do zewnątrzpaskowych pozassetaptycznych i synaptycznych receptorów (19), pozostały niezmienione po etomidacie (Suplementowa Figura 2, B i C). Read more „Ciągły wzrost funkcji receptora a5GABAA po uszkodzeniu pamięci pogarsza pamięć ad 5”