Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4

Wyciągi cytoplazmatyczne i jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych pustym wektorem lub wektory ekspresyjne dla E47, E47 lub E47555 mutanta E555K oceniano metodą Western blot przy użyciu przeciwciała specyficznego dla E47, przeciwciała, które rozpoznaje oba E12 i E47 lub przeciwciała przeciwko znanym białkom cytoplazmatycznym lub jądrowym. (B) EMSA przeprowadzono stosując znakowaną 32P sondę E5 i ekstrakty jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych wektorami wytwarzającymi mutanta E47 typu dzikiego E34, E47 lub E555K. Dziki typ i zmutowane prążki E47, ale nie prążki E12, przesiano z przeciwciałem do E47. (C, po lewej) Ekstrakty jądrowe z komórek transfekowanych zmiennymi ilościami (0 do 500 ng, jak wskazano u góry każdej ścieżki) mutanta E47 typu dzikiego i / lub E555K inkubowano z sondą AE5. Procent wiązania każdego ekstraktu pokazano poniżej każdej linii. Read more „Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4”

Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 5

Ponadto wiemy, że te komórki aktywnie przyczyniają się do angiogenezy nowotworu poprzez wytwarzanie MMP9 i mogą różnicować się w komórki śródbłonka (19). Inną podgrupą monocytów, która ma odgrywać ważną rolę, przynajmniej w angiogenezie nowotworu, jest komórka eksprymująca Tie-2, receptor angiopoetynowy. Stwierdzono, że komórki te krążą w ludzkiej krwi i nowotworach, a eksperymenty na nich ukierunkowane wykazały upośledzoną angiogenezę guza (20). Ze względu na wszechobecną ekspresję pewnych markerów powierzchni komórki w populacjach komórek szpikowych, czasami trudno jest określić, czy te proangiogenne komórki są odrębnymi lub nakładającymi się populacjami. Na przykład, komórki CDllb + mogą być progenitorami hematopoetycznymi VEGFR1 + lub komórkami supresorowymi mieloidowymi Gr-1 +. Read more „Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 5”

Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 6

Może to wskazywać na ograniczenia w diagnostyce EBV, reaktywności krzyżowej w danym TCR lub TCR. łańcuch, nasza niekompletna wiedza o publicznych klonach EBV i / lub przewaga prywatnych klonów u poszczególnych pacjentów. Podsumowując, stwierdziliśmy, że połączenie HDIT i autologicznego HSCT ma charakterystyczny i oddzielny wpływ na rekonstrukcje repertuaru CD4 + i CD8 +. W przypadku komórek T CD4 + dominujące klony TCR obecne przed leczeniem nie były wykrywalne po rekonstytucji, a pacjenci w dużym stopniu opracowali nowy repertuar. W przeciwieństwie do tego, dominujące klony CD8 + nie zostały skutecznie usunięte, a odtworzony repertuar CD8 + powstał przez klonalną ekspansję komórek, które były obecne przed traktowaniem. Read more „Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 6”

Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7

Infekcję obserwowano u 4 z 6 zakażonych myszy Pyy-Cre. rabG i nie obserwowano żadnej infekcji komórek w blaszce właściwej u 6 myszy typu dzikiego, które służyły jako kontrole. Ponieważ wirus wścieklizny rozprzestrzenia się przez synapsy w sposób retrogradacyjny, dane te podkreślają, że komórki enteroendokrynne są połączone synaptycznie z neuronami odprowadzającymi in vivo. Chociaż transmisja parakryn pozostaje nadal możliwa, uważamy, że fizyczne unerwienie sensorycznych komórek enteroendokrynowych otwiera następujące możliwości: (a) precyzyjne czasowe przekazywanie sygnałów zmysłowych ze światła jelita; (b) sprzężenie zwrotne modulacyjne w czasie rzeczywistym z komórkami enteroendokrynnymi; (c) umiejscowioną plastyczność na bodźce zmysłowe w jelitach; (d) dokładna topograficzna reprezentacja sygnałów czuciowych z jelit; i (e) biorąc pod uwagę warunki, potencjalną fizyczną ścieżkę dla wirusów w świetle jelita, aby uzyskać dostęp do obwodowego lub centralnego układu nerwowego. Metody Sekcja Suplementowe metody zawiera procedury dla współhodowli, znakowania pulsu BrdU, neurotracingu wścieklizny i obrazowania. Read more „Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7”

Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów

Przedwczesna niewydolność jajników (POF) jest heterogennym zaburzeniem genetycznym i fenotypowym, obejmującym osoby z objawami od początkowego braku miesiączki do utraty czynności menstruacyjnej przed 40. rokiem życia. POF przedstawia hipogonadyzm hipergonadotropowy i może być częścią zespołu lub występować w izolacji. Tutaj badaliśmy 3 siostry z pierwotnym brakiem miesiączki, niedoczynnością tarczycy i hipogonadyzmem hipergonadotropowym. Siostry urodziły się dla rodziców, którzy są pierwszymi kuzynami. Read more „Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów”

Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni

Zespół Li-Fraumeni (LFS) jest zaburzeniem predyspozycji do raka wywołanym przez mutacje w linii płciowej w TP53, które mogą prowadzić do zwiększonego metabolizmu mitochondrialnego u pacjentów. Jednak implikacje zmienionej funkcji mitochondriów dla tworzenia się guzów w LFS są niejasne. Tutaj donieśliśmy, że genetyczne lub farmakologiczne zaburzenie oddychania mitochondrialnego poprawia przeżycie bez raka w mysim modelu LFS, który wyraża zmutowany p53. Mechanistycznie, zahamowanie funkcji mitochondriów zwiększyło autofagię i zmniejszyło nieprawidłową sygnalizację proliferacji wywołaną przez zmutowany p53. W badaniu pilotażowym pacjenci z LFS leczeni metforminą wykazywali spadek aktywności mitochondrialnej współistniejący z aktywacją sygnalizacji antyproliferacyjnej, odtwarzając w ten sposób skutki zaburzeń czynności mitochondrialnych obserwowanych u myszy LFS. Read more „Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni”

Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad

Najpierw ustaliliśmy, czy warunkowa inaktywacja Med12 powoduje mięśniaki gładkie. Ponieważ Med12 ulega ekspresji z chromosomu X, losowa inaktywacja chromosomu X prowadzi do losowej ekspresji macierzystego lub matczynego locus Med12 w macicznych komórkach macicy. Przeszliśmy przez Cre (Amhr2-Cre) (10) sterowany receptorem hormonu typu Mullerian (10) za pomocą Med12fl / fl zwierząt (9) w celu wytworzenia zwierząt Med12fl / + Amhr2-Cre i zbadano wpływ niedoboru Med12 w subpopulacji macicy mezenchymalnej komórki. Zastosowanie zwierząt Med12fl / +, w których allel jest floxed, a drugie jest WT, pozwoliło nam, w obecności rekombinazy Amhr2-Cre, na wygenerowanie populacji mozaikowej komórek, które eksprymują lub nie zawierają Med12. Ponieważ Amhr2-Cre działa dobrze po ustaleniu inaktywacji chromosomu X (E6.5) (11), utrata funkcji Med12 nie doprowadzi do wypaczonej inaktywacji X myszy w macicy. Read more „Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad”

Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej cd

Dane analizowano za pomocą ANOVA, a następnie testu Dunnetta. Do analizy danych CPP zastosowano dwuczynnikową ANOVA (parowanie vs. leczenie) i test post hoc Bonferroni. Wyniki różnic analizowano za pomocą podwójnego testu t dla pary. *** P <0,001 vs. Read more „Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej cd”

Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 6

Przyszłe badania będą musiały zidentyfikować oddziaływanie jądrowe Trib1 w hepatocytach i wyjaśnić ich funkcjonalne konsekwencje w odniesieniu do lipogenezy i produkcji VLDL. Podsumowując, GWAS zidentyfikował SNP w pobliżu TRIB1, aby wiązać się z poziomem TG w osoczu, LDL-C i HDL-C oraz ryzykiem zawału mięśnia sercowego. Przed naszymi badaniami te stowarzyszenia nie zostały zwalidowane funkcjonalnie, a potencjalne mechanizmy nie były znane. Nasze badania na myszach potwierdzają, że ekspresja Trib1 w wątrobie reguluje poziomy VLDL i cholesterolu LDL w osoczu oraz poziomy TG. Co więcej, dostarczamy funkcjonalne dowody na istnienie mechanizmu leżącego u jego podstaw, a mianowicie, że wątrobowy Trib1 wpływa na ekspresję genów lipogennych i lipogenezę, z późniejszymi skutkami na produkcję VLDL i lipidy w osoczu. Read more „Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 6”

Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.

Badaliśmy szlak aktywacji protrombiny w krwi i osoczu. Za pomocą szybkiej procedury oczyszczania z udziałem chromatografii na DEAE-celulozie i hydroksyapatycie, wykazaliśmy, że główny fragment protrombiny w surowicy reprezentuje amino-końcową połowę protrombiny (tj. F1-2). Izolowany F1-2 charakteryzował się jego rozmiarem, składem aminokwasowym i antygenowym, resztą na końcu aminowym i peptydami (odpowiednio oznaczonymi F1 i F2) uzyskanymi po hydrolizie za pomocą trombiny. Pomiary metodą izotopowej rozcieńczenia wykazały, że F1-2 może odpowiadać za los co najmniej 90% protrombiny pierwotnie obecnej w osoczu. Read more „Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.”