Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4

Wyciągi cytoplazmatyczne i jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych pustym wektorem lub wektory ekspresyjne dla E47, E47 lub E47555 mutanta E555K oceniano metodą Western blot przy użyciu przeciwciała specyficznego dla E47, przeciwciała, które rozpoznaje oba E12 i E47 lub przeciwciała przeciwko znanym białkom cytoplazmatycznym lub jądrowym. (B) EMSA przeprowadzono stosując znakowaną 32P sondę E5 i ekstrakty jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych wektorami wytwarzającymi mutanta E47 typu dzikiego E34, E47 lub E555K. Dziki typ i zmutowane prążki E47, ale nie prążki E12, przesiano z przeciwciałem do E47. (C, po lewej) Ekstrakty jądrowe z komórek transfekowanych zmiennymi ilościami (0 do 500 ng, jak wskazano u góry każdej ścieżki) mutanta E47 typu dzikiego i / lub E555K inkubowano z sondą AE5. Procent wiązania każdego ekstraktu pokazano poniżej każdej linii. Read more „Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4”

Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 5

Ponadto wiemy, że te komórki aktywnie przyczyniają się do angiogenezy nowotworu poprzez wytwarzanie MMP9 i mogą różnicować się w komórki śródbłonka (19). Inną podgrupą monocytów, która ma odgrywać ważną rolę, przynajmniej w angiogenezie nowotworu, jest komórka eksprymująca Tie-2, receptor angiopoetynowy. Stwierdzono, że komórki te krążą w ludzkiej krwi i nowotworach, a eksperymenty na nich ukierunkowane wykazały upośledzoną angiogenezę guza (20). Ze względu na wszechobecną ekspresję pewnych markerów powierzchni komórki w populacjach komórek szpikowych, czasami trudno jest określić, czy te proangiogenne komórki są odrębnymi lub nakładającymi się populacjami. Na przykład, komórki CDllb + mogą być progenitorami hematopoetycznymi VEGFR1 + lub komórkami supresorowymi mieloidowymi Gr-1 +. Read more „Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 5”

Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 7

Dane są dostępne za pośrednictwem systemu TrialShare firmy Immune Tolerance Network (ITN) TrialShare (https://www.itntrialshare.org/haltms.html), który umożliwia użytkownikowi filtrowanie podstawowych danych oraz generowanie danych liczbowych i wyników analizy w uzupełnieniu do dostarczone w ramach manuskryptu. Zatwierdzenie badania. Badanie HALT-MS (badanie fazy II nad terapią immunosupresyjną o dużej dawce [HDIT] za pomocą Carmustine, Etoposide, Cytarabine i Melphalan [BEAM] + Thymoglobulin oraz autologicznych komórek macierzystych hematopoetycznych CD34 + [HCT] w leczeniu złego rokowania Sclerosis) był sponsorowany przez NIAID i prowadzony przez ITN (ITN033AI) (ClinicalTrials.gov NCT00288626). Protokół został sprawdzony i zatwierdzony przez IRB w każdym z klinicznych miejsc, a wszyscy uczestnicy wyrazili świadomą zgodę przed ich udziałem. To prospektywne, otwarte, jednoramienne, wieloośrodkowe badanie kliniczne zostało zaprojektowane w celu określenia 5-letniej trwałości stabilizacji choroby u pacjentów z SM po HDIT i autologicznym HCT, z analizą okresową po 2 latach (15). Read more „Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 7”

Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7

Infekcję obserwowano u 4 z 6 zakażonych myszy Pyy-Cre. rabG i nie obserwowano żadnej infekcji komórek w blaszce właściwej u 6 myszy typu dzikiego, które służyły jako kontrole. Ponieważ wirus wścieklizny rozprzestrzenia się przez synapsy w sposób retrogradacyjny, dane te podkreślają, że komórki enteroendokrynne są połączone synaptycznie z neuronami odprowadzającymi in vivo. Chociaż transmisja parakryn pozostaje nadal możliwa, uważamy, że fizyczne unerwienie sensorycznych komórek enteroendokrynowych otwiera następujące możliwości: (a) precyzyjne czasowe przekazywanie sygnałów zmysłowych ze światła jelita; (b) sprzężenie zwrotne modulacyjne w czasie rzeczywistym z komórkami enteroendokrynnymi; (c) umiejscowioną plastyczność na bodźce zmysłowe w jelitach; (d) dokładna topograficzna reprezentacja sygnałów czuciowych z jelit; i (e) biorąc pod uwagę warunki, potencjalną fizyczną ścieżkę dla wirusów w świetle jelita, aby uzyskać dostęp do obwodowego lub centralnego układu nerwowego. Metody Sekcja Suplementowe metody zawiera procedury dla współhodowli, znakowania pulsu BrdU, neurotracingu wścieklizny i obrazowania. Read more „Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7”

Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów

Przedwczesna niewydolność jajników (POF) jest heterogennym zaburzeniem genetycznym i fenotypowym, obejmującym osoby z objawami od początkowego braku miesiączki do utraty czynności menstruacyjnej przed 40. rokiem życia. POF przedstawia hipogonadyzm hipergonadotropowy i może być częścią zespołu lub występować w izolacji. Tutaj badaliśmy 3 siostry z pierwotnym brakiem miesiączki, niedoczynnością tarczycy i hipogonadyzmem hipergonadotropowym. Siostry urodziły się dla rodziców, którzy są pierwszymi kuzynami. Read more „Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów”

Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad

Funkcja mitochondrialna w ustalonym mysim modelu LFS (p53172H / H), utworzona przez knockin mysiego odpowiednika ludzkiej mutacji hotspot p53 R175H (10), została bezpośrednio zakłócona przez wprowadzenie polimerazy DNA. Mutant D257A (Polgmut) do generowania częstych mutacji mtDNA (11). Ponieważ u większości myszy p53172H / H rozwijają się grasicze chłoniaki, zmierzono mitochondrialne oddychanie tkanki grasicy, które ujawniło zmniejszone zużycie tlenu (OCR) w sposób zależny od dawki allelu Polgmut (Figura 1A). Ten spadek metabolizmu oksydacyjnego był związany ze zwiększonym poziomem mleczanu we krwi (Figura 1A). Podobnie, zmniejszono mitochondrialny kompleks I, ale zwiększony transporter glukozy 4 i heksokinazę 2, które promują glikolizę, obserwowano w mięśniu szkieletowym myszy z mutacją Polg (dodatkowa figura 1, materiał dodatkowy i nieedytowane bąki dostępne w Internecie z tym artykułem; doi: 10.1172 / JCI88668DS1). Read more „Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad”

Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad

Najpierw ustaliliśmy, czy warunkowa inaktywacja Med12 powoduje mięśniaki gładkie. Ponieważ Med12 ulega ekspresji z chromosomu X, losowa inaktywacja chromosomu X prowadzi do losowej ekspresji macierzystego lub matczynego locus Med12 w macicznych komórkach macicy. Przeszliśmy przez Cre (Amhr2-Cre) (10) sterowany receptorem hormonu typu Mullerian (10) za pomocą Med12fl / fl zwierząt (9) w celu wytworzenia zwierząt Med12fl / + Amhr2-Cre i zbadano wpływ niedoboru Med12 w subpopulacji macicy mezenchymalnej komórki. Zastosowanie zwierząt Med12fl / +, w których allel jest floxed, a drugie jest WT, pozwoliło nam, w obecności rekombinazy Amhr2-Cre, na wygenerowanie populacji mozaikowej komórek, które eksprymują lub nie zawierają Med12. Ponieważ Amhr2-Cre działa dobrze po ustaleniu inaktywacji chromosomu X (E6.5) (11), utrata funkcji Med12 nie doprowadzi do wypaczonej inaktywacji X myszy w macicy. Read more „Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad”

Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej cd

Dane analizowano za pomocą ANOVA, a następnie testu Dunnetta. Do analizy danych CPP zastosowano dwuczynnikową ANOVA (parowanie vs. leczenie) i test post hoc Bonferroni. Wyniki różnic analizowano za pomocą podwójnego testu t dla pary. *** P <0,001 vs. Read more „Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej cd”

Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 7

Płytki cDNA ludzkiej tkanki MTC z wielokrotnymi tkankami I i II (Clontech) zastosowano do analizy ekspresji TRIB1 w 16 ludzkich tkankach. W badaniach na myszach cDNA wytworzono z całkowitego RNA wyekstrahowanego z zamrożonych wątrób przy użyciu standardowych protokołów. Ilościowy RT-PCR przeprowadzono na detektorze sekwencji ABI PRISM 7900 (Applied Biosystems). Względne różnice w ekspresji obliczono stosując porównawczą metodę Ct (Ct) i p-aktynę jako gen porządkowania. Generowanie komórek HepG2 ze stabilną nadekspresją TRIB1. Read more „Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 7”

Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.

Badaliśmy szlak aktywacji protrombiny w krwi i osoczu. Za pomocą szybkiej procedury oczyszczania z udziałem chromatografii na DEAE-celulozie i hydroksyapatycie, wykazaliśmy, że główny fragment protrombiny w surowicy reprezentuje amino-końcową połowę protrombiny (tj. F1-2). Izolowany F1-2 charakteryzował się jego rozmiarem, składem aminokwasowym i antygenowym, resztą na końcu aminowym i peptydami (odpowiednio oznaczonymi F1 i F2) uzyskanymi po hydrolizie za pomocą trombiny. Pomiary metodą izotopowej rozcieńczenia wykazały, że F1-2 może odpowiadać za los co najmniej 90% protrombiny pierwotnie obecnej w osoczu. Read more „Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.”