Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4

Wyciągi cytoplazmatyczne i jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych pustym wektorem lub wektory ekspresyjne dla E47, E47 lub E47555 mutanta E555K oceniano metodą Western blot przy użyciu przeciwciała specyficznego dla E47, przeciwciała, które rozpoznaje oba E12 i E47 lub przeciwciała przeciwko znanym białkom cytoplazmatycznym lub jądrowym. (B) EMSA przeprowadzono stosując znakowaną 32P sondę E5 i ekstrakty jądrowe z komórek HEK-293 transfekowanych wektorami wytwarzającymi mutanta E47 typu dzikiego E34, E47 lub E555K. Dziki typ i zmutowane prążki E47, ale nie prążki E12, przesiano z przeciwciałem do E47. (C, po lewej) Ekstrakty jądrowe z komórek transfekowanych zmiennymi ilościami (0 do 500 ng, jak wskazano u góry każdej ścieżki) mutanta E47 typu dzikiego i / lub E555K inkubowano z sondą AE5. Procent wiązania każdego ekstraktu pokazano poniżej każdej linii. Read more „Powtarzająca się dominująca negatywna mutacja E47 powoduje agammaglobulinemię i BCR Komórki B. czesc 4”

Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 6

Bewacizumab w połączeniu z chemioterapią dla nawracającego glejaka daje wskaźnik odpowiedzi radiologicznej wynoszący 66%, a 6-miesięczny wskaźnik przeżycia bez progresji (PFS) wynoszący 40% jest rutynowo zgłaszany (22). Liczby te mogą wydawać się ponure, chyba że w porównaniu z obecną standardową terapią temozolomidu, która ma współczynnik PFS wynoszący 21% (23). Bezpośrednie hamowanie VEGFR przez doustny, niespecyficzny inhibitor kinazy tyrozynowej cediranib i specyficzny inhibitor suneginibu VEGFR został wykorzystany z podobnym efektem. Główną zaletą tych terapii może nie być ich działanie przeciwnowotworowe, ale raczej normalizacja naczyń krwionośnych guza w stopniu umożliwiającym zwiększone dostarczanie i ekspozycję guza na chemioterapię i zmniejszenie niedotlenienia guza, co może poprawić skuteczność napromieniania nowotworu. Tabela Potencjalne cele i związane z nimi terapie przeciw angiogenezie i przeciw-waskulogenezie w leczeniu glejaka i innych nowotworów Oporność na kontynuowanie terapii antyangiogennej może również wpływać na cząsteczki, takie jak SDF-1 i Tie-2; jednakże trudno jest zignorować centralną rolę rekrutacji komórek CD11b + Gr-1 + do nowotworów w wyjaśnianiu podstawowej oporności na terapię przeciw VEGF. Read more „Przeciwdziałanie zatrzymaniu: przejście od angiogenezy do waskulogenezy w nawracających złośliwych glejakach ad 6”

Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 7

Dane są dostępne za pośrednictwem systemu TrialShare firmy Immune Tolerance Network (ITN) TrialShare (https://www.itntrialshare.org/haltms.html), który umożliwia użytkownikowi filtrowanie podstawowych danych oraz generowanie danych liczbowych i wyników analizy w uzupełnieniu do dostarczone w ramach manuskryptu. Zatwierdzenie badania. Badanie HALT-MS (badanie fazy II nad terapią immunosupresyjną o dużej dawce [HDIT] za pomocą Carmustine, Etoposide, Cytarabine i Melphalan [BEAM] + Thymoglobulin oraz autologicznych komórek macierzystych hematopoetycznych CD34 + [HCT] w leczeniu złego rokowania Sclerosis) był sponsorowany przez NIAID i prowadzony przez ITN (ITN033AI) (ClinicalTrials.gov NCT00288626). Protokół został sprawdzony i zatwierdzony przez IRB w każdym z klinicznych miejsc, a wszyscy uczestnicy wyrazili świadomą zgodę przed ich udziałem. To prospektywne, otwarte, jednoramienne, wieloośrodkowe badanie kliniczne zostało zaprojektowane w celu określenia 5-letniej trwałości stabilizacji choroby u pacjentów z SM po HDIT i autologicznym HCT, z analizą okresową po 2 latach (15). Read more „Repertuar komórek T po autologicznym transplantacji komórek macierzystych w stwardnieniu rozsianym ad 7”

Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7

Infekcję obserwowano u 4 z 6 zakażonych myszy Pyy-Cre. rabG i nie obserwowano żadnej infekcji komórek w blaszce właściwej u 6 myszy typu dzikiego, które służyły jako kontrole. Ponieważ wirus wścieklizny rozprzestrzenia się przez synapsy w sposób retrogradacyjny, dane te podkreślają, że komórki enteroendokrynne są połączone synaptycznie z neuronami odprowadzającymi in vivo. Chociaż transmisja parakryn pozostaje nadal możliwa, uważamy, że fizyczne unerwienie sensorycznych komórek enteroendokrynowych otwiera następujące możliwości: (a) precyzyjne czasowe przekazywanie sygnałów zmysłowych ze światła jelita; (b) sprzężenie zwrotne modulacyjne w czasie rzeczywistym z komórkami enteroendokrynnymi; (c) umiejscowioną plastyczność na bodźce zmysłowe w jelitach; (d) dokładna topograficzna reprezentacja sygnałów czuciowych z jelit; i (e) biorąc pod uwagę warunki, potencjalną fizyczną ścieżkę dla wirusów w świetle jelita, aby uzyskać dostęp do obwodowego lub centralnego układu nerwowego. Metody Sekcja Suplementowe metody zawiera procedury dla współhodowli, znakowania pulsu BrdU, neurotracingu wścieklizny i obrazowania. Read more „Obwód neuroepitelialny utworzony przez unerwienie czuciowych komórek enteroendokrynnych ad 7”

Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów ad

Wszystkie 3 probandy są obecnie leczone terapią zastępczą estrogenem i progesteronem oraz doświadczają regularnych cykli menstruacyjnych. U wszystkich 3 pacjentów zdiagnozowano również niedoczynność tarczycy i wystąpiła odpowiedź na tyroksynę. Matka (III-2) weszła w pierwszą miesiączkę w wieku 14 lat, zgłosiła normalny rozwój płciowy i regularne miesiączki (26-28 dniowe cykle miesiączkowe) do połowy lat 40., a jej ostatni zarejestrowany okres menstruacyjny miał 49 lat. nie jest znaną historią rodzinną niedokrwistości, dysrazji krwi, nadwrażliwości na światło, niedoboru odporności lub nowotworów złośliwych. Wykluczyliśmy autoimmunologiczną kandydozę polendokrynopatii z zespołem dystrakcji ektodermalnej (APECED) (MIM 240300) pod nieobecność kandydozy śluzówkowo-skórnej, hipokalcemii, hipoglikemii, niedociśnienia, bielactwa, łysienia, niedokrwistości lub zapalenia wątroby u dotkniętych nią córek. Read more „Sekwencjonowanie exome ujawnia mutację MCM8, która jest przyczyną niewydolności jajników i niestabilności chromosomów ad”

Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad

Funkcja mitochondrialna w ustalonym mysim modelu LFS (p53172H / H), utworzona przez knockin mysiego odpowiednika ludzkiej mutacji hotspot p53 R175H (10), została bezpośrednio zakłócona przez wprowadzenie polimerazy DNA. Mutant D257A (Polgmut) do generowania częstych mutacji mtDNA (11). Ponieważ u większości myszy p53172H / H rozwijają się grasicze chłoniaki, zmierzono mitochondrialne oddychanie tkanki grasicy, które ujawniło zmniejszone zużycie tlenu (OCR) w sposób zależny od dawki allelu Polgmut (Figura 1A). Ten spadek metabolizmu oksydacyjnego był związany ze zwiększonym poziomem mleczanu we krwi (Figura 1A). Podobnie, zmniejszono mitochondrialny kompleks I, ale zwiększony transporter glukozy 4 i heksokinazę 2, które promują glikolizę, obserwowano w mięśniu szkieletowym myszy z mutacją Polg (dodatkowa figura 1, materiał dodatkowy i nieedytowane bąki dostępne w Internecie z tym artykułem; doi: 10.1172 / JCI88668DS1). Read more „Hamowanie oddychania mitochondrialnego zapobiega rakowi w mysim modelu zespołu Li-Fraumeni ad”

Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad

Najpierw ustaliliśmy, czy warunkowa inaktywacja Med12 powoduje mięśniaki gładkie. Ponieważ Med12 ulega ekspresji z chromosomu X, losowa inaktywacja chromosomu X prowadzi do losowej ekspresji macierzystego lub matczynego locus Med12 w macicznych komórkach macicy. Przeszliśmy przez Cre (Amhr2-Cre) (10) sterowany receptorem hormonu typu Mullerian (10) za pomocą Med12fl / fl zwierząt (9) w celu wytworzenia zwierząt Med12fl / + Amhr2-Cre i zbadano wpływ niedoboru Med12 w subpopulacji macicy mezenchymalnej komórki. Zastosowanie zwierząt Med12fl / +, w których allel jest floxed, a drugie jest WT, pozwoliło nam, w obecności rekombinazy Amhr2-Cre, na wygenerowanie populacji mozaikowej komórek, które eksprymują lub nie zawierają Med12. Ponieważ Amhr2-Cre działa dobrze po ustaleniu inaktywacji chromosomu X (E6.5) (11), utrata funkcji Med12 nie doprowadzi do wypaczonej inaktywacji X myszy w macicy. Read more „Mutacja przyrostu masy Med12 powoduje mięśniaki gładkie i niestabilność genomu ad”

Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej czesc 4

Aktywacja PKC zmniejsza aktywność transportową GABA, zmniejszając ekspresję powierzchni komórkowej komórki (14) lub wydajność katalityczną (15), co sugeruje PKC. może promować przewlekły ból w SCD poprzez dezaktywację hamujących mechanizmów GABAergicznych. Aby zidentyfikować znaczenie funkcjonalne PKC. w sierpowacie, celowaliśmy bezpośrednio w PKC. myszy TOW i kontrolnych za pomocą kilku uzupełniających się podejść. Read more „Skierowana na PKC Interwencja łagodzi przewlekły ból w mysim modelu choroby sierpowatej czesc 4”

Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 7

Płytki cDNA ludzkiej tkanki MTC z wielokrotnymi tkankami I i II (Clontech) zastosowano do analizy ekspresji TRIB1 w 16 ludzkich tkankach. W badaniach na myszach cDNA wytworzono z całkowitego RNA wyekstrahowanego z zamrożonych wątrób przy użyciu standardowych protokołów. Ilościowy RT-PCR przeprowadzono na detektorze sekwencji ABI PRISM 7900 (Applied Biosystems). Względne różnice w ekspresji obliczono stosując porównawczą metodę Ct (Ct) i p-aktynę jako gen porządkowania. Generowanie komórek HepG2 ze stabilną nadekspresją TRIB1. Read more „Trib1 to gen związany z zawałem lipidów i mięśnia sercowego, który reguluje lipogenezę wątrobową i produkcję VLDL u myszy ad 7”

Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.

Badaliśmy szlak aktywacji protrombiny w krwi i osoczu. Za pomocą szybkiej procedury oczyszczania z udziałem chromatografii na DEAE-celulozie i hydroksyapatycie, wykazaliśmy, że główny fragment protrombiny w surowicy reprezentuje amino-końcową połowę protrombiny (tj. F1-2). Izolowany F1-2 charakteryzował się jego rozmiarem, składem aminokwasowym i antygenowym, resztą na końcu aminowym i peptydami (odpowiednio oznaczonymi F1 i F2) uzyskanymi po hydrolizie za pomocą trombiny. Pomiary metodą izotopowej rozcieńczenia wykazały, że F1-2 może odpowiadać za los co najmniej 90% protrombiny pierwotnie obecnej w osoczu. Read more „Wytwarzanie połączonego peptydu aktywującego protrombinę (F1-2) podczas krzepnięcia krwi i osocza.”